bioselБиотехнология и селекция растенийPlant Biotechnology and Breeding2658-62662658-6258VIR10.30901/2658-6266-2021-4-o1biosel-130Research ArticleИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ РЕСУРСОВ РАСТЕНИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТОДОВ МОЛЕКУЛЯРНОЙ ГЕНЕТИКИSTUDY OF PLANT GENETIC RESOURCES USING MOLECULAR GENETICS METHODSПолиморфизм микросателлитных маркеров, сцепленных с локусами Rf1 и Pl5/Pl8 подсолнечника Helianthus annuus L.Polymorphism of microsatellite markers linked with Rf1 and Pl5/Pl8 loci in sunflower Helianthus annuus L.https://orcid.org/0000-0002-8384-5134КарабицинаЮ. И.KarabitsinaYu. I.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Большая Морская, 42, 44; Отдел генетики, младший научный сотрудник 

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia; Department of Genetics

yulijakarabitsina@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5531-2728АлпатьеваН. В.AlpatievaN. V.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Большая Морская, 42, 44; Отдел генетики, старший научный сотрудник; к.б.н.

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia; Department of Genetics

alpatievanatalia@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9804-1286КузнецоваЕ. Б.KusnetsovaE. B.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Большая Морская, 42, 44; Отдел генетики, младший научный сотрудник 

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia; Department of Genetics

kuznetsova.eb@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8110-9168ГавриловаВ. А.GavrilovaV. A.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Большая Морская, 42, 44; Отдел генетических ресурсов масличных и прядильных культур, главный научный сотрудник, заведующая отделом, куратор коллекции подсолнечника, клещевины; д.б.н.

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia; Department of Oil and Fiber Crops Genetic Resources

v.gavrilova@vir.nw.ruТитовН. В.TitovN. V.

196605 Россия, г. Санкт-Петербург, Пушкин, Петербургское шоссе, д. 10

10 Petersburgskoye shosse, Pushkin, St. Petersburg 196605, Russia

https://orcid.org/0000-0002-3019-0306РадченкоЕ. Е.RadchenkoE. E.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Большая Морская, 42, 44; Отдел генетики, главный научный сотрудник отдела генетики, руководитель отдела генетики и лаборатории иммунитета; д.б.н.

 

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia; Department of Genetics

Eugene_Radchenko@rambler.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0474-8860АнисимоваИ. Н.AnisimovaI. N.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Большая Морская, 42, 44; Отдел генетики, ведущий научный; д.б.н.

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia; Department of Genetics

irina_anisimova@inbox.ruФедеральный исследовательский центр Всероссийский институт генетических ресурсов растений имени Н.И. ВавиловаРоссияN.I. Vavilov All-Russian Institute of Plant Genetic ResourcesRussian FederationЛенинградский государственный университет имени А. С. ПушкинаРоссияPushkin Leningrad State UniversityRussian Federation20210701202244514Copyright © Карабицина Ю.И., Алпатьева Н.В., Кузнецова Е.Б., Гаврилова В.А., Титов Н.В., Радченко Е.Е., Анисимова И.Н., 20212021Карабицина Ю.И., Алпатьева Н.В., Кузнецова Е.Б., Гаврилова В.А., Титов Н.В., Радченко Е.Е., Анисимова И.Н.Karabitsina Y.I., Alpatieva N.V., Kusnetsova E.B., Gavrilova V.A., Titov N.V., Radchenko E.E., Anisimova I.N.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://biosel.elpub.ru/jour/article/view/130

Актуальность. Микросателлитные (SSR) маркеры являются эффективным инструментом для паспортизации коллекций генетических ресурсов растений, а также для идентификации генов, детерминирующих важные биологические и агрономические признаки. Изучение их полиморфизма важно для характеристики генетического разнообразия коллекции подсолнечника (Helianthus annuus L.) Цель настоящего исследования – анализ нуклеотидного полиморфизма SSR-маркеров, сцепленных с генами восстановления фертильности пыльцы (Rf1) и устойчивости к ложной мучнистой росе (Pl5/Pl8). Материал и методы. Изученный материал включал 84 самоопыленные линии генетической коллекции подсолнечника ВИР, гибриды F1 и F2 от скрещивания фертильных линий ВИР 365 и RIL130, а также гибриды от анализирующего скрещивания. С помощью ПЦР-анализа изучали полиморфизм SSR-маркеров ORS224, ORS511, ORS799 и НА4011. Для определения структуры микросателлитов и оценки характера их вариабельности, амплифицированные фрагменты были клонированы и секвенированы. Результаты. Уникальные, отличающиеся по длине от типичных (свойственных большинству генотипов), аллели маркерного локуса ORS224 выявлены у четырех линий выборки, а уникальные аллели локуса ORS511 - у 10 генотипов. У линии ВИР 365 уникальный аллель ORS511 был представлен двумя фрагментами длиной 161 пн и 240 пн, линия RIL 130 характеризовалась типичным фрагментом 159 пн. В F2 (ВИР 365 × RIL 130) и популяции от скрещивания ВИР 111А × (ВИР 365 × RIL 130) профили типичного и уникального маркеров наследовались как аллельные варианты одного локуса. Нуклеотидные последовательности уникальных аллелей отличались от типичных аллельных вариантов по длине и числу повторяющихся единиц (GA у ORS224 и AT/GT - у ORS511), а также наличию инделей и нуклеотидных замен. Отличия по длине аллельных вариантов 240 пн и 200 пн SSR-маркера НА4011 были обусловлены инделями длиной 80 пн, 47 пн и 4 пн. Заключение. Ряд линий генетической коллекции подсолнечника ВИР маркирован уникальными аллелями микросателлитных локусов ORS224 и ORS511, которые отличаются от часто встречающихся аллельных вариантов по длине и числу повторяющихся единиц, наличию инделей и нуклеотидных замен. Полиморфизм аллельных вариантов микросателлита НА4011 связан с наличием инделей 80 пн, 47 пн и 4 пн.

Background. Microsatellite (SSR) markers are an effective tool for certifying collections of plant genetic resources, as well as for identifying genes that determine valuable biological and agronomic traits. The knowledge of their polymorphism is important for characterizing genetic diversity within the sunflower (Helianthus annuus L.) collection. The present study was aimed at analyzing nucleotide polymorphism of SSR-markers linked with the genes for fertility restoration (Rf1) and downy mildew resistance (Pl5/Pl8). Materials and methods. The material included 84 self-pollinated lines of VIR sunflower genetic collection, F1 and F2 hybrids from crosses between fertile lines VIR 365 and RIL130, and offspring from test crosses. Polymorphism of SSR markers ORS224, ORS511, ORS799 and НА4011 was studied by means of PCR analysis. To determine the microsatellite structure and variability, the amplified fragments were cloned and sequenced. Results. The unique alleles which differed from the typical ones (characteristic for most genotypes) were revealed in the ORS224 marker locus of four lines, and the unique alleles in the ORS511 locus were observed in 10 lines. The ORS511 unique allele of line VIR 365 included two 161 and 240 bp fragments, while line RIL130 was characterized by a typical 159 bp fragment. The profiles of typical and unique markers were inherited as allelic variants of the same locus in F2 of (VIR 365 × RIL130) and a population from VIR 111A × (VIR 365 × RIL130). The nucleotide sequences of unique alleles differed from typical allelic variants in the length and number of repeat units (GA in ORS224 and AT/GT in ORS511), and also by the presence of indels and nucleotide substitutions. Differences in length of НА4011 marker 240 and 200 bp allele variants were caused by 80, 47 and 44 bp indels. Conclusions. A number of lines in the VIR sunflower genetic collection are marked by the unique alleles of microsatellite loci ORS224 and ORS511, which differ from the frequently occurring variants in the length and number of repeat units, as well as in the presence of indels and nucleotide substitutions. Polymorphism of allele variants of HA4011 microsatellite is associated with the presence of indels of 80, 47 and 4 bp.

Helianthus annuus L.линииSSR-маркерыаллелинаследованиеповторяющийся мотивинделиHelianthus annuus L.self-pollinated linesgenetic collectionSSR markersinheritancerepeat motifindelsРабота выполнена в рамках государственного задания согласно тематическому плану ВИР по проекту № 0662-2019-0001 «Коллекция масличных и прядильных культур ВИР: Изучение и расширение генетического разнообразия».The research was performed within the framework of the State Assignment according to the Thematic Plan of VIR, Project No. 0662-2019-0001 “The Collection of Oil and Fiber Crops at VIR: Maintenance, Study, and Genetic Diversity Expansion”.ReferencesАнащенко А.В. Химическая кастрация подсолнечника. Доклады Всесоюзной академии сельскохозяйственных наук имени В.И. Ленина. 1967(2):17-18.Anashchenko A.V. The chemical castration of sunflower plants. Doklady Vsesoyuznoi Akademii Sel'skokhozyaistvennykh Nauk imeni V.I. Lenina = Reports of the All-Union Academy of Agricultural Sciences named after V.I. Lenin. 1967(2):17-18. [in Russian].Алпатьева Н.В., Антонова О.Ю., Радченко Е.Е., Абдуллаев Р.А., Карабицина Ю.И., Анисимова И.Н. ПЦР-диагностика вредных организмов гуара: (методические указания) / под ред. Е.К. Потокиной. Санкт-Петербург: ВИР; 2019. DOI: 10.30901/978-5-907145-44-3Alpatieva N.V., Antonova O.Yu., Radchenko E.E., Abdullaev R.A., Karabitsina Y.I., Anisimova I.N. PCR diagnostics for harmful organisms of guar: (guidelines). E. K. Potokina (ed.). St. Petersburg: VIR; 2019. [in Russian]. DOI: 10.30901/978-5-907145-44-3Анисимова И.Н., Карабицина Ю.И., Алпатьева Н.В., Кузнецова Е.Б., Титов Н.В., Лютко А.Ю., Гаврилова В.А. Диагностическая ценность молекулярных маркеров гена Rf1 подсолнечника. Биотехнология и селекция растений. 2021;4(2):28-37. DOI: 10.30901/2658-6266-2021-2-o3Anisimova I.N., Karabitsina Yu.I., Alpatieva N.V., Kusnetsova E.B., Titov N.V., Lyutko A.Yu., Gavrilova V.A. Diagnostic value of Rf1 gene molecular markers in sunflower. Plant Biotechnology and Breeding. 2021;4(2):28-37. [in Russian). DOI: 10.30901/2658-6266-2021-2-o3Антонова Т.С., Ивебор М.В., Рожкова В.Т., Арасланова Н.М., Гаврилова В.А. Результаты оценки образцов подсолнечника коллекции ВИР на устойчивость к расам возбудителя ложной мучнистой росы, распространенным в Краснодарском крае. Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2011;167:90-95.Antonova T.S., Ivebor M.V., Rozhkova V.T., Araslanova N.P., Gavrilova V.A. Results of evaluation of accessions from the VIR sunflower collection for resistance to downy mildew strains spread in the Krasnodar Territory. Bulletin of Applied Botany, of Genetics, and Plant Breeding. 2011;167:90-95. [in Russian].Arias D.M., Rieseberg L.H. Genetic relationship among domesticated and wild sunflower (Helianthus annuus, Asteraceae). Economic Botany. 1995;49:239-248.Arias D.M., Rieseberg L.H. Genetic relationship among domesticated and wild sunflower (Helianthus annuus, Asteraceae). Economic Botany. 1995;49:239-248.Baute G.J., Kane N.C., Grassa C.J., Lai Z., Rieseberg L.H. Genome scans reveal candidate domestication and improvement genes in cultivated sunflower, as well as post-domestication introgression with wild relatives. New Phytologist. 2015;206:830-838. DOI: 10.1111/nph.13255Baute G.J., Kane N.C., Grassa C.J., Lai Z., Rieseberg L.H. Genome scans reveal candidate domestication and improvement genes in cultivated sunflower, as well as post-domestication introgression with wild relatives. New Phytologist. 2015;206:830-838. DOI: 10.1111/nph.13255Berry S.T., Leon A.J., Hanfrey C.C., Challis P., Burkholz A., Barnes S.J., Rufener G.K., Lee M., Caligari P.D.S. Molecular-marker analysis of Helianthus annuus L. II. Construction of an RFLP linkage map for cultivated sunflower. Theoretical and Applied Genetics. 1995;91:195-199. DOI: 10.1007/BF00220877Berry S.T., Leon A.J., Hanfrey C.C., Challis P., Burkholz A., Barnes S.J., Rufener G.K., Lee M., Caligari P.D.S. Molecular-marker analysis of Helianthus annuus L. II. Construction of an RFLP linkage map for cultivated sunflower. Theoretical and Applied Genetics. 1995;91:195-199. DOI: 10.1007/BF00220877Бочковой А.Д., Хатнянский В.И., Камардин В.А. Типы гибридов подсолнечника и особенности их использования в условиях Российской Федерации. Масличные культуры. 2019;1(177):110-123. DOI: 10.25230/2412-608X-2019-1-177-110-123Bochkovoy A.D., Khatnyansky V.I., Kamardin V.A. Types of sunflower hybrids and features of their use in conditions of the Russian Federation (review). Oil Crops. 2019;1(177):110-123. [in Russian]. DOI: 10.25230/2412-608X-2019-1-177-110-123Bulos M., Ramos M.L., Altieri E., Sala C.A. Molecular mapping of a sunflower rust resistance gene from HAR6. Breeding Science. 2013;63(1):141-146. DOI: 10.1270/jsbbs.63.141Bulos M., Ramos M.L., Altieri E., Sala C.A. Molecular mapping of a sunflower rust resistance gene from HAR6. Breeding Science. 2013;63(1):141-146. DOI: 10.1270/jsbbs.63.141Cheres M.T., Knapp S. Ancestral origins and genetic diversity of cultivated sunflower: coancestry analysis of public germplasm. Crop Science. 1998;38:1476-1482. DOI: 10.2135/cropsci1998.0011183X003800060012xCheres M.T., Knapp S. Ancestral origins and genetic diversity of cultivated sunflower: coancestry analysis of public germplasm. Crop Science. 1998;38:1476-1482. DOI: 10.2135/cropsci1998.0011183X003800060012xDakin E.E., Avise J.C. Microsatellite null alleles in parentage analysis. Heredity. 2004;93(5):504-509. DOI: 10.1038/sj.hdy.6800545Dakin E.E., Avise J.C. Microsatellite null alleles in parentage analysis. Heredity. 2004;93(5):504-509. DOI: 10.1038/sj.hdy.6800545Darvishzadeh R., Azizi M., Hatami-Maleki H., Bernousi I., B. Abdollahi Mandoulakani B., Jafari M., Sarrafi A. Molecular characterization and similarity relationships among sunflower (Helianthus annuus L.) inbred lines using some mapped simple sequence repeats. African Journal of Biotechnology. 2010;9(43):7280-7288. DOI: 10.5897/AJB10.902Darvishzadeh R., Azizi M., Hatami-Maleki H., Bernousi I., B. Abdollahi Mandoulakani B., Jafari M., Sarrafi A. Molecular characterization and similarity relationships among sunflower (Helianthus annuus L.) inbred lines using some mapped simple sequence repeats. African Journal of Biotechnology. 2010;9(43):7280-7288. DOI: 10.5897/AJB10.902Dimitrijević A., Imerovski I., Miladinović D., Tančić S., Dušanić N., Jocić S., Miklič V. Use of SSR markers in identification of sunflower isogenic lines in late generations of backcrossing. Helia. 2010;33(53):191-198. DOI: 10.2298/HEL1053191DDimitrijević A., Imerovski I., Miladinović D., Tančić S., Dušanić N., Jocić S., Miklič V. Use of SSR markers in identification of sunflower isogenic lines in late generations of backcrossing. Helia. 2010;33(53):191-198. DOI: 10.2298/HEL1053191DDuca M., Port A., Şestacova T., Siniauskaya M., Aksyonova E., Davydenko O. Microsatellite marker application in sunflower (Helianthus annuus L.) fingerprinting. Biotechnology and Biotechnological Equipment. 2013;27(3):3772-3775. DOI: 10.5504/BBEQ.2013.0021Duca M., Port A., Şestacova T., Siniauskaya M., Aksyonova E., Davydenko O. Microsatellite marker application in sunflower (Helianthus annuus L.) fingerprinting. Biotechnology and Biotechnological Equipment. 2013;27(3):3772-3775. DOI: 10.5504/BBEQ.2013.0021Filippi C.V., Aguirre N., Rivas J.G., Zubrzycki J., Puebla A., Cordes D., Moreno M.V., Fusari C.M., Alvarez D., Heinz R.A., Hopp H.E., Paniego N.B., Lia V.V. Population structure and genetic diversity characterization of a sunflower association mapping population using SSR and SNP markers. BMC Plant Biology. 2015;15:52. DOI: 10.1186/s12870-014-0360-xFilippi C.V., Aguirre N., Rivas J.G., Zubrzycki J., Puebla A., Cordes D., Moreno M.V., Fusari C.M., Alvarez D., Heinz R.A., Hopp H.E., Paniego N.B., Lia V.V. Population structure and genetic diversity characterization of a sunflower association mapping population using SSR and SNP markers. BMC Plant Biology. 2015;15:52. DOI: 10.1186/s12870-014-0360-xFilippi C.V., Gabriela A., Merino G.A., Montecchia J.F., Aguirre N.C., Rivarola M., Naamati G., Fass M.J., Álvarez D., Rienzo J.D., Heinz R.A., Moreira B.C., Lia V.V., Paniego N.B. Genetic diversity, population structure and linkage disequilibrium assessment among international sunflower breeding collections. Genes. 2020;11:283. DOI: 10.3390/genes11030283Filippi C.V., Gabriela A., Merino G.A., Montecchia J.F., Aguirre N.C., Rivarola M., Naamati G., Fass M.J., Álvarez D., Rienzo J.D., Heinz R.A., Moreira B.C., Lia V.V., Paniego N.B. Genetic diversity, population structure and linkage disequilibrium assessment among international sunflower breeding collections. Genes. 2020;11:283. DOI: 10.3390/genes11030283Galinskaya T.V., Schepetov D.M., Lysenkov S.N. Prejudices against microsatellite studies and how to resist them. Russian Journal of Genetics. 2019;55(6):657-671. DOI: 10.1134/S1022795419060048Galinskaya T.V., Schepetov D.M., Lysenkov S.N. Prejudices against microsatellite studies and how to resist them. Russian Journal of Genetics. 2019;55(6):657-671. DOI: 10.1134/S1022795419060048Garayalde A.F., Poverene M., Cantamutto M., Carrera A.D. Wild sunflower diversity in Argentina revealed by ISSR and SSR markers: an approach for conservation and breeding programmes. Annals of Applied Botany. 2011;158(3):305-317. DOI: 10.1111/j.1744-7348.2011.00465.xGarayalde A.F., Poverene M., Cantamutto M., Carrera A.D. Wild sunflower diversity in Argentina revealed by ISSR and SSR markers: an approach for conservation and breeding programmes. Annals of Applied Botany. 2011;158(3):305-317. DOI: 10.1111/j.1744-7348.2011.00465.xГаврилова В.А., Рожкова В.Т. Доноры восстановления фертильности пыльцы линий ЦМС подсолнечника для гетерозисной селекции. В кн.: Идентифицированный генофонд растений и селекция. Санкт-Петербург: ВИР, 2005. С.377-379.Gavrilova V.A., Rozhkova V.T. Donors of Pollen Fertility Restoration of Sunflower CMS Lines for Heterosis Breeding. In: Identified plant genepool and breeding. St. Petersburg: VIR; 2005. p.377-379. [in Russian].Gavrilova V.A., Rozhkova V.T., Anisimova I.N. Sunflower genetic collection at the Vavilov Institute of Plant Industry. Helia. 2014;37(60):1-16. DOI: 10.1515/helia-2014-0001Gavrilova V.A., Rozhkova V.T., Anisimova I.N. Sunflower genetic collection at the Vavilov Institute of Plant Industry. Helia. 2014;37(60):1-16. DOI: 10.1515/helia-2014-0001Gentzbittel L., Vear F., Zhang Y.-X., Berville A., Nicolas P. Development of a consensus linkage RFLP map for cultivated sunflower. Theoretical and Applied Genetics. 1995;90:1079-1086.Gentzbittel L., Vear F., Zhang Y.-X., Berville A., Nicolas P. Development of a consensus linkage RFLP map for cultivated sunflower. Theoretical and Applied Genetics. 1995;90:1079-1086.Hongtrakul V., Huestis G.M., Knapp S. Amplified fragment length polymorphisms as a tool for DNA fingerprinting sunflower germplasm: genetic diversity among oilseed inbred lines. Theoretical and Applied Genetics. 1997;95(3):400-407. DOI: 10.1007/s001220050576Hongtrakul V., Huestis G.M., Knapp S. Amplified fragment length polymorphisms as a tool for DNA fingerprinting sunflower germplasm: genetic diversity among oilseed inbred lines. Theoretical and Applied Genetics. 1997;95(3):400-407. DOI: 10.1007/s001220050576Horn R., Kusterer B., Lazarescu E., Prüfe M., Friedt W. Molecular mapping of the Rf1 gene restoring fertility in PET1-based F1 hybrids in sunflower (Helianthus annuus L.). Theoretical and Applied Genetics. 2003;106(4):599-606. DOI: 10.1007/s00122-002-1078-yHorn R., Kusterer B., Lazarescu E., Prüfe M., Friedt W. Molecular mapping of the Rf1 gene restoring fertility in PET1-based F1 hybrids in sunflower (Helianthus annuus L.). Theoretical and Applied Genetics. 2003;106(4):599-606. DOI: 10.1007/s00122-002-1078-yImerovski I., Dimitrijević A., Miladinović D., Jocić S., Dedić B., Cvejić S., Surlan-Momirović G. Identification and validation of breeder-friendly DNA markers for Plarg gene in sunflower. Molecular Breeding. 2014;34(3):779-788. DOI: 10.1007/s11032-014-0074-7Imerovski I., Dimitrijević A., Miladinović D., Jocić S., Dedić B., Cvejić S., Surlan-Momirović G. Identification and validation of breeder-friendly DNA markers for Plarg gene in sunflower. Molecular Breeding. 2014;34(3):779-788. DOI: 10.1007/s11032-014-0074-7Leclerq P. Une sterilite cytoplasmique chez le tournesol. Annales de l Amelioration des Plantes. 1969;19(2):99-106. [in French]Leclerq P. Une sterilite cytoplasmique chez le tournesol. Annales de l Amelioration des Plantes. 1969;19(2):99-106. [in French]Li J.T., Yang J., Chen D.C., Zhang X.I., Tang Z.S. An optimized mini-preparation method to obtain high-quality genomic DNA from mature leaves of sunflower. Genetics and Molecular Research. 2007;6(4):1064-1071.Li J.T., Yang J., Chen D.C., Zhang X.I., Tang Z.S. An optimized mini-preparation method to obtain high-quality genomic DNA from mature leaves of sunflower. Genetics and Molecular Research. 2007;6(4):1064-1071.Карабицина Ю.И., Анисимова И.Н., Гаврилова В.А., Алпатьева Н.В., Пинаев А.Г., Кузнецова Е.Б., Рожкова В.Т. Молекулярное маркирование линий подсолнечника, различающихся по способности к супрессии фенотипа цитоплазматической мужской стерильности. Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2016;177(2):99-107. DOI: 10.30901/2227-8834-2016-2-99-107Karabitsina Yu.I., Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Alpatieva N.V., Pinaev A.G., Kuznetsova E.B., Rozhkova V.T. Molecular marking of sunflower lines with different ability to suppression of the cytoplasmic male sterility phenotype. Proceedings on Applied Botany, Genetics, and Breeding 2016;177(2):99-107. [in Russian]. DOI: 10.30901/2227-8834-2016-2-99-107Маркин Н.В. Усатенко Т.В., Усатов А.В., Тихобаева В.Е., Горбаченко О.Ф., Кулишова Г.А., Азарин К.В. Определение информативных ДНК-маркеров гена Rf1 – восстановителя фертильности пыльцы ЦМС PET1 подсолнечника. Современные проблемы науки и образования. 2013;(4):110-122.Markin N.V., Usatenko T.V., Usatov A.V., Tikhobaeva V.E., Gorbachenko O.F., Kulishova G.A., Azarin K.V. Informative DNA markers of gene Rf1 – pollen fertility restorer CMS PET1 in sunflower. Modern Problems of Science and Education. 2013;(4):110-122. [in Russian].Markin N., Usatov A., Makarenko M., Azarin K., Gorbachenko O., Kolokolova N., Usatenko T., Markina O., Gavrilova V. Study of informative DNA markers of the Rf1 gene in sunflower for breeding practice. Czech Journal of Genetics and Plant Breeding. 2017;53(2):69-75. DOI: 10.17221/108/2016-CJGPBMarkin N., Usatov A., Makarenko M., Azarin K., Gorbachenko O., Kolokolova N., Usatenko T., Markina O., Gavrilova V. Study of informative DNA markers of the Rf1 gene in sunflower for breeding practice. Czech Journal of Genetics and Plant Breeding. 2017;53(2):69-75. DOI: 10.17221/108/2016-CJGPBMwangi E.W., Marzougui S., Sung J.S., Bwalya E.C., Choi Y.-M., Lee M.-C. Assessment of genetic diversity and population structure on Kenyan sunflower (Helianthus annus L.) breeding lines by SSR markers. Korean Journal of Plant Resources. 2019;32(3):244-253. DOI: 10.7732/kjpr.2019.32.3.244Mwangi E.W., Marzougui S., Sung J.S., Bwalya E.C., Choi Y.-M., Lee M.-C. Assessment of genetic diversity and population structure on Kenyan sunflower (Helianthus annus L.) breeding lines by SSR markers. Korean Journal of Plant Resources. 2019;32(3):244-253. DOI: 10.7732/kjpr.2019.32.3.244Paniego N., Echaide M., Munoz M., Fernandez L., Torales S., Faccio P., Fuxan I., Carrera M., Zandomeni R., Suarez E.Y., Hopp H.E. Microsatellite isolation and characterization in sunflower (Helianthus annuus L.). Genome. 2002;45(1):34-43. DOI: 10.1139/g01-120Paniego N., Echaide M., Munoz M., Fernandez L., Torales S., Faccio P., Fuxan I., Carrera M., Zandomeni R., Suarez E.Y., Hopp H.E. Microsatellite isolation and characterization in sunflower (Helianthus annuus L.). Genome. 2002;45(1):34-43. DOI: 10.1139/g01-120Рожкова В.Т., Анащенко А.В. Создание самоопыленных линий и гетерозисных гибридов подсолнечника на материале мировой коллекции. Научно-технический бюллетень Всесоюзного научно-исследовательского института растениеводства им. Н.И. Вавилова. 1977;69:53-55.Rozhkova V.T., Anashchenko A.V. Creation of self-pollinated lines and heterotic hybrids of sunflower on the basis of global collection. Research Bulletin of the N.I. Vavilov Institute of Plant Industry. 1977;69:53-55. [in Russian].Şahin E., Kalenderoğlu A., Aydın Y., Evci G., Uncuoğlu A. SSR markers suitable for marker assisted selection in sunflower for downy mildew resistance. Open Life Sciences. 2018;13(1):319-326. DOI: 10.1515/biol-2018-0039Şahin E., Kalenderoğlu A., Aydın Y., Evci G., Uncuoğlu A. SSR markers suitable for marker assisted selection in sunflower for downy mildew resistance. Open Life Sciences. 2018;13(1):319-326. DOI: 10.1515/biol-2018-0039Солоденко А.Е., Файт B.I., Iдентифiкацiя генотипiв соняшника гiбридного похождення за маркерами гена PlARG cтiйкостi до несправжньоi борошнистоi роси. Физиология растений и генетикa. 2017;49(6):506-512. DOI: 10.15407/frg2017.06.506Solodenko A.Ye., Fait V.I. Identification of sunflower hybrids with markers of resistance to downy mildew gene Plarg. Fiziologiya rastenij i genetika = Plant Physiology and Genetics. 2017;49(6):506-512. [in Ukranian]. DOI: 10.15407/frg2017.06.506Sujatha M., Prabakaran A.J., Dwivedi S.L., Chandra S. Cytomorphological and molecular diversity in backcross-derived inbred lines of sunflower (Helianthus annuus L.). Genome. 2008;51(4):282-293. DOI: 10.1139/G08-008Sujatha M., Prabakaran A.J., Dwivedi S.L., Chandra S. Cytomorphological and molecular diversity in backcross-derived inbred lines of sunflower (Helianthus annuus L.). Genome. 2008;51(4):282-293. DOI: 10.1139/G08-008Tang S., Yu J.K., Slabaugh M.B., Shintani K., Knapp J. Simple sequence repeat map of the sunflower genome. Theoretical and Applied Genetics. 2002;105:1124-1136. DOI: 10.1007/s00122-002-0989-yTang S., Yu J.K., Slabaugh M.B., Shintani K., Knapp J. Simple sequence repeat map of the sunflower genome. Theoretical and Applied Genetics. 2002;105:1124-1136. DOI: 10.1007/s00122-002-0989-yWieckhorst S., Bachlava E., Dußle C.M., Tang S., Gao W., Saski C., Bauer E. Fine mapping of the sunflower resistance locus Plarg introduced from the wild species Helianthus argophyllus. Theoretical and Applied Genetics. 2010;121(8):1633-1644. DOI: 10.1007/s00122-010-1416-4Wieckhorst S., Bachlava E., Dußle C.M., Tang S., Gao W., Saski C., Bauer E. Fine mapping of the sunflower resistance locus Plarg introduced from the wild species Helianthus argophyllus. Theoretical and Applied Genetics. 2010;121(8):1633-1644. DOI: 10.1007/s00122-010-1416-4Yue B., Vick B.A., Cai X., Hu J. Genetic mapping for the Rf1 (fertility restoration) gene in sunflower (Helianthus annuus L.) by SSR and TRAP markers. Plant Breeding. 2010;129(1):24-28. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2009.01661.xYue B., Vick B.A., Cai X., Hu J. Genetic mapping for the Rf1 (fertility restoration) gene in sunflower (Helianthus annuus L.) by SSR and TRAP markers. Plant Breeding. 2010;129(1):24-28. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2009.01661.xZia Z.U., Sadaqat H.A., Tahir M.H.N., Sadia B., Bushman B.S., Hole D., Michaels L., Malik W. Estimation of genetic diversity using SSR markers in sunflower. Russian Journal of Genetics. 2014;50:498-507. DOI: 10.7868/s0016675814050142Zia Z.U., Sadaqat H.A., Tahir M.H.N., Sadia B., Bushman B.S., Hole D., Michaels L., Malik W. Estimation of genetic diversity using SSR markers in sunflower. Russian Journal of Genetics. 2014;50:498-507. DOI: 10.7868/s0016675814050142

The authors declare that there are no conflicts of interest present.