bioselБиотехнология и селекция растенийPlant Biotechnology and Breeding2658-62662658-6258VIR10.30901/2658-6266-2021-2-o3biosel-134Research ArticleМЕТОДЫ БИОТЕХНОЛОГИИ В СЕМЕНОВОДСТВЕ И СЕЛЕКЦИИ РАСТЕНИЙBIOTECHNOLOGY TECHNIQUES IN SEED PRODUCTION AND PLANT BREEDINGДиагностическая ценность молекулярных маркеров гена Rf1 подсолнечникаDiagnostic value of Rf1 gene molecular markers in sunflowerhttps://orcid.org/0000-0003-0474-8860АнисимоваИ. Н.AnisimovaI. N.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Б. Морская, 42, 44

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia

irina_anisimova@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8384-5134КарабицинаЮ. И.KarabitsinaYu. I.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Б. Морская, 42, 44

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia

https://orcid.org/0000-0002-5531-2728АлпатьеваН. В.AlpatievaN. V.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Б. Морская, 42, 44

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia

https://orcid.org/0000-0002-9804-1286КузнецоваЕ. Б.KusnetsovaE. B.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Б. Морская, 42, 44

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia

ТитовН. В.TitovN. V.

196605 Россия, г. Санкт-Петербург, Пушкин, Петербургское шоссе, д. 10

10 Petersburgskoye Shosse, Pushkin, St. Petersburg 196605, Russia

ЛюткоА. Ю.LyutkoA. Yu.

196605 Россия, г. Санкт-Петербург, Пушкин, Петербургское шоссе, д. 10

10 Petersburgskoye Shosse, Pushkin, St. Petersburg 196605, Russia

https://orcid.org/0000-0002-8110-9168ГавриловаВ. А.GavrilovaV. A.

190000 Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Б. Морская, 42, 44

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190000, Russia

Федеральный исследовательский центр Всероссийский институт генетических ресурсов растений имени Н.И. Вавилова (ВИР)N.I. Vavilov All-Russian Institute of Plant Genetic Resources (VIR)Ленинградский государственный университет имени А. С. ПушкинаPushkin Leningrad State University202107122021422837Copyright © Анисимова И.Н., Карабицина Ю.И., Алпатьева Н.В., Кузнецова Е.Б., Титов Н.В., Лютко А.Ю., Гаврилова В.А., 20212021Анисимова И.Н., Карабицина Ю.И., Алпатьева Н.В., Кузнецова Е.Б., Титов Н.В., Лютко А.Ю., Гаврилова В.А.Anisimova I.N., Karabitsina Y.I., Alpatieva N.V., Kusnetsova E.B., Titov N.V., Lyutko A.Y., Gavrilova V.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://biosel.elpub.ru/jour/article/view/134Актуальность

Актуальность. Современное производство семян подсолнечника основано на возделывании высокопродуктивных гетерозисных гибридов F1 от скрещиваний линий с цитоплазматической мужской стерильностью (ЦМС) РЕТ1-типа и линий-восстановителей фертильности пыльцы. Донором функционального аллеля ядерного гена Rf1, ответственного за восстановление фертильности пыльцы растений F1, служит отцовская линия. Выявление носителей рецессивных и доминантных аллелей локуса Rf1 с помощью диагностических молекулярных маркеров позволяет ускорить процесс селекции материнских и отцовских родительских линий для создания гибридов.

Материалы и методы

Материалы и методы. Материалом для исследования служили 75 линий генетической коллекции подсолнечника ВИР различного происхождения, а также гибриды от скрещиваний стерильной линии ВИР 116А с фертильными линиями, различавшимися по типу цитоплазмы (фертильный или стерильный) и наличию молекулярных маркеров, большинство которых сцеплены с локусом Rf1. Для валидации маркеров использовали два подхода: 1) анализ ассоциаций между способностью линии к восстановлению фертильности пыльцы, либо к закреплению стерильности, и присутствием в генотипе молекулярных маркеров, а также 2) оценку частоты рекомбинации между локусом Rf1 и маркерными локусами в четырех расщепляющихся гибридных популяциях F2.

Результаты

Результаты. Ни один из маркеров не показал 100% эффективности при анализе изученной выборки генотипов. Чаще всего, среди линий, предположительно несущих доминантный аллель Rf1, отмечался маркер ORS511. Показатели фертильности пыльцы гибридов F1 от межлинейных скрещиваний составили 89–99%. Расщепление растений F2 по признаку фертильность/стерильность пыльцы было близко к теоретически ожидаемому 3:1 при моногенном контроле признака. Маркеры HRG01, HRG02, ORS511 наследовались сцепленно с признаком восстановления фертильности, при этом частота рекомбинации между локусом Rf1 и маркерами различалась в разных комбинациях скрещиваний. По данным анализа гибридов ВИР 116А × ВИР 740 и ВИР 116А × RIL 130, среди изученных маркерных локусов ближе всех к локусу Rf1 расположен маркер ORS511 (2,2 и 3,3%, соответственно). В скрещивании ВИР 116А × ВИР 210 частота рекомбинации между локусами Rf1 и ORS511 составила 7,5%, а в комбинации ВИР116 × ВИР195 –8,9%.

Заключение

Заключение. Для идентификации аллелей гена Rf1 в коллекции генетических ресурсов подсолнечника и для маркер-опосредованного отбора в расщепляющихся гибридных популяциях, полученных с участием линий генетической коллекции ВИР, наиболее эффективны маркеры ORS511, HRG01 и HRG02.

Background

Background. Modern production of sunflower seeds is currently based on the cultivation of high-yielding heterotic F1 hybrids from crossbreeding of lines with cytoplasmic male sterility (CMS) of PET1-type and fertility restorer lines. The paternal parent serves as a donor of the nuclear Rf1 gene functional allele, which is responsible for pollen fertility restoration in F1 plants. The detection of carriers of the Rf1 locus recessive and dominant alleles using diagnostic molecular markers accelerates breeding of female and male parental lines for creating hybrids.

Materials and methods

Materials and methods. The material for the study included 75 lines of various origins from the VIR sunflower genetic collection as well as hybrids from crosses of VIR 116A sterile line with fertile lines differing in the type of cytoplasm (fertile or sterile) and the presence of molecular markers, most of which were linked to the Rf1 locus. For marker validation, two different approaches were used: either by analyzing associations between the ability of a line to restore pollen fertility and the presence of molecular markers in its genotype, or by estimating recombination frequency between the Rf1 locus and marker loci in four segregating hybrid populations.

Results

Results. According to the obtained results, no markers demonstrated 100% efficiency in the analysis of the sample of genotypes. The ORS511 marker was most frequently observed among the lines presumably carrying the dominant allele Rf1. Pollen fertility of F1 hybrids from interline crossings was 89-99%. The segregation for fertility/sterility in F2 fitted the theoretical ratio of 3:1 expected in case of the monogenic control of the trait. The markers HRG01, HRG02 and ORS511 were linked to the fertility restoration trait, with recombination rates between Rf1 locus and markers varying in different cross combinations. The analysis of VIR 116А × VIR 740 and VIR 116А × RIL 130 hybrids showed that among the marker loci studied, the ORS511 was closest to the Rf1 locus Rf1 (recombination frequency of 2.2 and 3.3%, respectively). The recombination rate between the Rf1 and ORS511 loci equaled 7.5% in the cross VIR 116А × VIR 210 and 8.9% in VIR 116 × VIR 195.

Conclusion

Conclusion. The markers ORS511, HRG01 and HRG02 are the most efficient for the identification of alleles of the Rf1 gene and for the marker assisted selection in hybrid populations produced involving sunflower lines from the VIR collection.

Helianthus annuusЦМС РЕТ1восстановление фертильности пыльцымаркер-опосредованный отборнаследованиерекомбинацияHelianthus annuusCMS PET1pollen fertility restorationmarker assisted selectioninheritancerecombinationРабота выполнена при поддержке Министерства науки и высшего образования России в рамках соглашения № 075-15-2020-911 от 16.11.2020 о предоставлении гранта в форме субсидий из федерального бюджета на осуществление государственной поддержки создания и развития научного центра мирового уровня «Агротехнологии будущего».The work was carried out with the support of the Ministry of Science and Higher Education of the Russian Federation in the framework of Agreement No. № 075-15-2020-911 of 16.11.2020 on providing a grant in the form of subsidies from the federal budget for the implementation of state support for the creation and development of the world-class scientific center “Agrotechnologies for the futureˮ.ReferencesAfjani J.A., Najafabadi M.S., Mirfakhraei R.G. Gene-based marker to differentiate among B, A, and R lines in hybrid production of rapeseed Ogura system. Iranian Journal of Biotechnology. 2019;17(3):50-54. DOI: 10.29252/ijb.1870Afjani J.A., Najafabadi M.S., Mirfakhraei R.G. Gene-based marker to differentiate among B, A, and R lines in hybrid production of rapeseed Ogura system. Iranian Journal of Biotechnology. 2019;17(3):50-54. DOI: 10.29252/ijb.1870Анисимова И.Н., Алпатьева Н.В., Абдуллаев Р.А., Карабицина Ю.И., Кузнецова Е.Б. Скрининг генетических ресурсов растений с использованием ДНК-маркеров: основные принципы, выделение ДНК, постановка ПЦР, электрофорез в агарозном геле: (методические указания) / под ред. Е.Е. Радченко. Санкт-Петербург: ВИР; 2018. DOI: 10.30901/978-5-905954-81-8Anisimova I.N., Alpatyeva N.V., Abdullaev R.A., Karabitsina Y.I., Kuznetsova E.B. Screening of plant genetic resources with the use of DNA markers: basic principles, DNA isolation, PCR setup, agarose gel electrophoresis: (guidelines). E.E. Radchenko (ed.). St. Petersburg: VIR; 2018. [in Russian] DOI: 10.30901/978-5-905954-81-8Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Rozhkova, Port A.I., Timofeeva G.I., Duka M.V. Genetic diversity of sources of sunflower pollen fertility restorer genes. Russian Agricultural Sciences. 2011;37:192-196. DOI: 10.3103/S1068367411030025Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Rozhkova, Port A.I., Timofeeva G.I., Duka M.V. Genetic diversity of sources of sunflower pollen fertility restorer genes. Russian Agricultural Sciences. 2011;37:192-196. DOI: 10.3103/S1068367411030025Анисимова И.Н., Гаврилова В.А., Алпатьева Н.В., Кузнецова Е.Б., Карабицина Ю.И., Рожкова В.Т. Коллекция подсолнечника в исследованиях генетических механизмов восстановления фертильности пыльцы. Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2014;175(4):72-82.Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Alpatieva N.V., Kuznetsova E.B., Karabitsina Y.I., Rozhkova V.T. Sunflower collection in the studies of pollen fertility restoration genetic mechanisms. Proceedings of Applied Botany, Genetics and Breeding. 2014;175(4):72-82. [in Russian]Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Rozhkova V.T., Timofeeva G.I., Tikhonova M.A. Molecular markers in identification of sunflower pollen fertility restorer genes. Russian Agricultural Sciences. 2009;35:367-370. DOI: 10.3103/S1068367409060020Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Rozhkova V.T., Timofeeva G.I., Tikhonova M.A. Molecular markers in identification of sunflower pollen fertility restorer genes. Russian Agricultural Sciences. 2009;35:367-370. DOI: 10.3103/S1068367409060020Bulos M., Ramos M.L., Altieri E., Sala C.A. Molecular mapping of a sunflower rust resistance gene from HAR6. Breeding Science. 2013;63(1):141-146. DOI: 10.1270/jsbbs.63.141Bulos M., Ramos M.L., Altieri E., Sala C.A. Molecular mapping of a sunflower rust resistance gene from HAR6. Breeding Science. 2013;63(1):141-146. DOI: 10.1270/jsbbs.63.141Челюстникова Т.А., Гучетль С.З., Антонова Т.С. Применение молекулярных маркеров для идентификации ЦМС-Rf системы в родительских линиях гибридов подсолнечника. Масличные культуры. 2017;4(172):3-9.Chelyustnikova T.A., Guchetl S.Z., Antonova T.S. Usage of molecular markers for identification of CMS-Rf system in parental lines of sunflower hybrids. Oil Crops. 2017;4(172):3-9. [in Russian]Carvalho C.G.P., Toledo J.F.F. Extracting female inbred lines from commercial sunflower hybrids. Pesquisa Agropecuária Brasileira. 2008;43(9):1159-162. DOI: 10.1590/S0100-204X2008000900009Carvalho C.G.P., Toledo J.F.F. Extracting female inbred lines from commercial sunflower hybrids. Pesquisa Agropecuária Brasileira. 2008;43(9):1159-162. DOI: 10.1590/S0100-204X2008000900009Feng J., Zhang X., Zhang M., Guo L., Qi T., Tang H., Zhu H., Wang H., Qiao X., Xing C., Wu J. Physical mapping and InDel marker development for the restorer gene Rf2 in cytoplasmic male sterile CMS-D8 cotton. BMC Genomics. 2021;22(1):24. DOI: 10.1186/s12864-020-07342-yFeng J., Zhang X., Zhang M., Guo L., Qi T., Tang H., Zhu H., Wang H., Qiao X., Xing C., Wu J. Physical mapping and InDel marker development for the restorer gene Rf2 in cytoplasmic male sterile CMS-D8 cotton. BMC Genomics. 2021;22(1):24. DOI: 10.1186/s12864-020-07342-yГаврилова В.А., Рожкова В.Т. Доноры восстановления фертильности пыльцы линий ЦМС подсолнечника для гетерозисной селекции. В кн.: Идентифицированный генофонд растений и селекция. 2005;377-379.Gavrilova V.A., Rozhkova V.T. Donors of Pollen Fertility Restoration of Sunflower CMS Lines for Heterosis Breeding. In: Identified plant genepool and breeding. St. Petersburg; 2005. p.377-379. [in Russian]Gavrilova V.A., Rozhkova V.T., Anisimova I.N. Sunflower genetic collection at the Vavilov Institute of Plant Industry. Helia. 2014;37(60):1-16. DOI: 10.1515/helia-2014-0001Gavrilova V.A., Rozhkova V.T., Anisimova I.N. Sunflower genetic collection at the Vavilov Institute of Plant Industry. Helia. 2014;37(60):1-16. DOI: 10.1515/helia-2014-0001Goryunov D.V., Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Chernova A.I., Sotnikova E.A., Martynova E.U., Boldyrev S.V., Ayupova A.F., Gubaev R.F., Mazin P.V., Gurchenko E.A., Shumskiy A.A., Petrova D.A., Garkusha S.V., Mukhina Z.M., Benko N.I., Demurin Y.N., Khaitovich P.E., Goryunova S.V. Association mapping of fertility restorer gene for CMS PET1 in sunflower. Agronomy. 2019;9(2):49. DOI: 10.3390/agronomy9020049Goryunov D.V., Anisimova I.N., Gavrilova V.A., Chernova A.I., Sotnikova E.A., Martynova E.U., Boldyrev S.V., Ayupova A.F., Gubaev R.F., Mazin P.V., Gurchenko E.A., Shumskiy A.A., Petrova D.A., Garkusha S.V., Mukhina Z.M., Benko N.I., Demurin Y.N., Khaitovich P.E., Goryunova S.V. Association mapping of fertility restorer gene for CMS PET1 in sunflower. Agronomy. 2019;9(2):49. DOI: 10.3390/agronomy9020049Horn R., Kusterer B., Lazarescu E., Prüfe M., Friedt W. Molecular mapping of the Rf1 gene restoring fertility in PET1-based F1 hybrids in sunflower (Helianthus annuus L.). Theoretical and Applied Geneics. 2003;106(4):599-606. DOI: 10.1007/s00122-002-1078-yHorn R., Kusterer B., Lazarescu E., Prüfe M., Friedt W. Molecular mapping of the Rf1 gene restoring fertility in PET1-based F1 hybrids in sunflower (Helianthus annuus L.). Theoretical and Applied Geneics. 2003;106(4):599-606. DOI: 10.1007/s00122-002-1078-yHorn R., Radanovic A., Fuhrmann L., Sprycha Y., Hamrit S., Jockovic M., Miladinovic D., Jansen C. Development and validation of markers for the fertility restorer gene Rf1 in sunflower. International Journal of Molecular Sciences. 2019;20(6):1260. DOI: 10.3390/ijms20061260Horn R., Radanovic A., Fuhrmann L., Sprycha Y., Hamrit S., Jockovic M., Miladinovic D., Jansen C. Development and validation of markers for the fertility restorer gene Rf1 in sunflower. International Journal of Molecular Sciences. 2019;20(6):1260. DOI: 10.3390/ijms20061260Hu X., Sullivan-Gilbert M., Kubik T., Danielson J., Hnatiuk N., Marchione W., Greene T., Thompson S.A. Mapping of the Ogura fertility restorer gene Rfo and development of Rfo allele-specific markers in canola (Brassica napus L.). Molecular Breeding. 2008;22:663-674. DOI: 10.1007/s11032-008-9207-1Hu X., Sullivan-Gilbert M., Kubik T., Danielson J., Hnatiuk N., Marchione W., Greene T., Thompson S.A. Mapping of the Ogura fertility restorer gene Rfo and development of Rfo allele-specific markers in canola (Brassica napus L.). Molecular Breeding. 2008;22:663-674. DOI: 10.1007/s11032-008-9207-1Leclerq P. Une sterilite cytoplasmique chez le tournesol. Ann. Amelior. Plant. 1969;19(2):99-106. [In French].Leclerq P. Une sterilite cytoplasmique chez le tournesol. Ann. Amelior. Plant. 1969;19(2):99-106. [In French].Леонова И.Н. Молекулярные маркеры: использование в селекции зерновых культур для идентификации, интрогрессии и пирамидирования генов. Вавиловский журнал генетики и селекции. 2013;17(2):314-325). DOI: 10.1134/S2079059713060051Leonova I.N. Molecular markers: implementation in crop plant breeding for identification, introgression, and gene pyramiding. Russian Journal of Genetics. 2013;17(2):314-325. [in Russian] DOI: 10.1134/S2079059713060051Li J.T., Yang J., Chen D.C., Zhang X.I., Tang Z.S. An optimized mini-preparation method to obtain high-quality genomic DNA from mature leaves of sunflower. Genetics and Molecular Research. 2007;6(4):1064-1071.Li J.T., Yang J., Chen D.C., Zhang X.I., Tang Z.S. An optimized mini-preparation method to obtain high-quality genomic DNA from mature leaves of sunflower. Genetics and Molecular Research. 2007;6(4):1064-1071.Маркин Н.В. Усатенко Т.В., Усатов А.В., Тихобаева В.Е., Горбаченко О.Ф., Кулишова Г.А., Азарин К.В. Определение информативных ДНК-маркеров гена Rf1 – восстановителя фертильности пыльцы ЦМС PET1 подсолнечника. Современные проблемы науки и образования. 2013;4:110-122.Markin N.V., Usatenko T.V., Usatov A.V., Tikhobaeva V.E., Gorbachenko O.F., Kulishova G.A., Azarin K.V. Informative DNA markers of gene Rf1 – pollen fertility restorer CMS PET1 in sunflower. Modern Problems of Science and Education. 2013;4:110-122. [in Russian]Markin N., Usatov A., Makarenko M., Azarin K., Gorbachenko O., Kolokolova N., Usatenko T., Markina O., Gavrilova V. Study of informative DNA markers of the Rf1 gene in sunflower for breeding practice. Czech Journal of Genetics and Plant Breeding. 2017;53(2):69-75. DOI: 10.17221/108/2016-CJGPBMarkin N., Usatov A., Makarenko M., Azarin K., Gorbachenko O., Kolokolova N., Usatenko T., Markina O., Gavrilova V. Study of informative DNA markers of the Rf1 gene in sunflower for breeding practice. Czech Journal of Genetics and Plant Breeding. 2017;53(2):69-75. DOI: 10.17221/108/2016-CJGPBНавашин, С.Г. Избранные труды. Т. 1 / под ред. В.Н. Сукачева, П.А. Баранова, М.С. Навашина. Москва; Ленинград: Изд-во АН СССР; 1951.Navashin S.G. Selected works. Vol. 1. V.N. Sukachev, P.A. Baranov, M.S. Navashin (eds). Moscow; Leningrad: Academy of Sciences of the USSR; 1951. [in Russian]Owens G.L., Baute G.J., Hubner S., Rieseberg L.H. Genomic sequence and copy number evolution during hybrid crop development in sunflowers. Evolutionary Applications. 2018;12(1):54-65. DOI: 10.1111/eva.12603Owens G.L., Baute G.J., Hubner S., Rieseberg L.H. Genomic sequence and copy number evolution during hybrid crop development in sunflowers. Evolutionary Applications. 2018;12(1):54-65. DOI: 10.1111/eva.12603Рокицкий П.Ф. Введение в статистическую генетику. Минск: Вышэйшая школа; 1974.Rokitskii P.F. Introduction to statistical genetics (Vvedenie v statisticheskuyu genetiku). Minsk: Vysheishaya shkola; 1974. [in Russian]Şahin E., Kalenderoğlu A., Aydın Y., Evci G., Uncuoğlu A. SSR markers suitable for marker assisted selection in sunflower for downy mildew resistance. Open Life Sciences. 2018;13(1):319-326. DOI: 10.1515/biol-2018-0039Şahin E., Kalenderoğlu A., Aydın Y., Evci G., Uncuoğlu A. SSR markers suitable for marker assisted selection in sunflower for downy mildew resistance. Open Life Sciences. 2018;13(1):319-326. DOI: 10.1515/biol-2018-0039Schnabel U., Engelmann U., Horn R. Development of markers for the use of the PEF1 cytoplasm in sunflower hybrid breeding. Plant Breeding. 2008;127(6):587-591. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2008.01516.xSchnabel U., Engelmann U., Horn R. Development of markers for the use of the PEF1 cytoplasm in sunflower hybrid breeding. Plant Breeding. 2008;127(6):587-591. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2008.01516.xSun X., Liu Y., Wang L., Zhu X., Gong Y., Xu L., Liu L. Molecular characterization of the Rs-Rf1 gene and molecular marker-assisted development of elite radish (Raphanus sativus L.) CMS lines with a functional marker for fertility restoration. Molecular Breeding. 2012;30(4):1727-1736. DOI: 10.1007/s11032-012-9756-1Sun X., Liu Y., Wang L., Zhu X., Gong Y., Xu L., Liu L. Molecular characterization of the Rs-Rf1 gene and molecular marker-assisted development of elite radish (Raphanus sativus L.) CMS lines with a functional marker for fertility restoration. Molecular Breeding. 2012;30(4):1727-1736. DOI: 10.1007/s11032-012-9756-1Tang S., Yu J.K., Slabaugh M.B., Shintani K., Knapp J. Simple sequence repeat map of the sunflower genome. Theoretical and Applied Genetics. 2002;105:1124-1136. DOI: 10.1007/s00122-002-0989-yTang S., Yu J.K., Slabaugh M.B., Shintani K., Knapp J. Simple sequence repeat map of the sunflower genome. Theoretical and Applied Genetics. 2002;105:1124-1136. DOI: 10.1007/s00122-002-0989-yВоронова О.Н., Гаврилова В.А. Количественный и качественный анализ пыльцы подсолнечника (Helianthus L.) и его использование в селекционной работе. Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2019;180(1):95-104. DOI: 10.30901/2227-8834-2019-1-95-104Voronova O.N., Gavrilova V.A. Quantitative and qualitative analysis of sunflower pollen (Helianthus L.) and it's use in breeding work. Proceedings on Applied Botany, Genetics and Breeding. 2019;180(1):95-104. [in Russian] DOI: 10.30901/2227-8834-2019-1-95-104Yue B., Vick B.A., Cai X., Hu J. Genetic mapping for the Rf1 (fertility restoration) gene in sunflower (Helianthus annuus L.) by SSR and TRAP markers. Plant Breeding. 2010;129(1):24-28. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2009.01661.xYue B., Vick B.A., Cai X., Hu J. Genetic mapping for the Rf1 (fertility restoration) gene in sunflower (Helianthus annuus L.) by SSR and TRAP markers. Plant Breeding. 2010;129(1):24-28. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2009.01661.x

The authors declare that there are no conflicts of interest present.