bioselБиотехнология и селекция растенийPlant Biotechnology and Breeding2658-62662658-6258VIR10.30901/2658-6266-2021-4-o2biosel-137Research ArticleГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ БИОТЕХНОЛОГИИGENETIC BASIS OF BIOTECHNOLOGYНовые интрогрессивные формы культурного ячменя, полученные на основе межвидовых гибридов Hordeum vulgare L. × Hordeum bulbosum L.New introgressive forms of cultivated barley obtained on the basis of interspecific hybrids Hordeum vulgare L. × Hordeum bulbosum L.https://orcid.org/0000-0003-2814-7074ПендиненГ. И.PendinenG. I.

Отдел биотехнологии, старший научный сотрудник

42, 44 Bolshaya Morskaya Street, St. Petersburg 190031, Russia

pendinen@mail.ruФедеральный исследовательский центр Всероссийский институт генетических ресурсов растений имени Н.И. ВавиловаN.I. Vavilov All-Russian Institute of Plant Genetic Resources202125012022442539Copyright © Пендинен Г.И., 20212021Пендинен Г.И.Pendinen G.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://biosel.elpub.ru/jour/article/view/137

Актуальность. Привлечение чужеродного генетического материала ячменя луковичного Hordeum bulbosum L. для расширения разнообразия ячменя культурного Hordeum vulgare L. является важной задачей, поскольку вид H. bulbosum характеризуется рядом ценных признаков. Одним из путей использования генетического потенциала ячменя луковичного служит межвидовая гибридизация и получение на основе гибридов фертильных интрогрессивных линий H. vulgare. Цель исследования – получение новых интрогрессивных форм ярового ячменя с использованием межвидовых триплоидного (HvHbHb) и тетраплоидного (HbHbHvHv) гибридов культурного ячменя с ячменем луковичным для расширения коллекции интрогрессивных линий H. vulgare. Материал и методы. Для создания новых интрогрессивных форм, диплоидный ячмень культурный H. vulgare (2x) сорта ‘Roland’ опыляли пыльцой межвидовых гибридов: 1) триплоидного, полученного при скрещивании диплоидного ячменя сорта ‘Roland’ (2x, HvHv) c тетраплоидным образцом ячменя луковичного H. bulbosum W851 (4x, HbHbHbHb): H.vulgare ‘Roland (2x) × H. bulbosum W851 (4x) (HvHbHb); 2) тетраплоидного, полученного при использованиии в скрещивании тетраплоидного образцы H. bulbosum А17 (4x, HbHbHbHb) в качестве материнской формы и тетраплоидного культурного ячменя сорта ‘Borwina’ (4x, HvHvHvHv) в качестве опылителя: H. bulbosum A17 (4x) × H. vulgare ‘Borwina’ (4x) (HbHbHvHv). В потомстве от этих скрещиваний отбирали формы культурного ячменя с интрогрессией генетического материала ячменя луковичного, далее отбор продолжали в двух поколениях от самоопыления растений первого поколения, полученных в результате возвратных скрещиваний, то есть растений ВС1 с чужеродными интрогрессиями. Идентификацию и локализацию интрогрессий проводили с использованием метода флюоресцентной in situ гибридизации (GISH и FISH c хромосомоспецифичными маркерами). Результаты. При скрещивании культурного ячменя с триплоидным и тетраплоидным межвидовыми гибридами H. vulgare × H. bulbosum получены новые формы ячменя культурного с рекомбинантными хромосомами, среди которых выделено два растения с тремя терминальными интрогрессиями генетического материала ячменя луковичного. У первого растения, полученного на основе триплоидного гибрида, выявлены интрогресии в хромосомах 5HL; 1HL; 3HS. При сочетании в кариотипе двух гомологов с интрогрессией 5HL исходного размера у растений в потомстве наблюдается гибель проростков. У второго растения, полученного на основе тетраплоидного гибрида, выявлены интрогресии в хромосомах 5HL, 2HL, 7HS. В потомстве от самоопыления этой формы наличие интрогресии 2HL исходного размера в обоих гомологах приводит к стерильности растений. Выявлены формы с изменением размеров интрогрессий в 5HL и 3HS в потомстве первого растения и с изменением размеров интрогрессии в 2HL в потомстве второго растения, что свидетельствует о рекомбинации в мейозе в этих участках хромосом у растений ВС1. Заключение. При скрещивании культурного ячменя с триплоидным межвидовым гибридом H. vulgare × H. bulbosum в потомстве выявлено растение культурного ячменя с интрогрессиями в хромосомах 1HL, 5HL, 3HS. При скрещивании с тетраплоидным межвидовым гибридом выявлено растение культурного ячменя с интрогрессиями в хромосомах 2HL, 5HL, 7HS. На основе ярового сорта ячменя ‘Roland’ cозданы две серии новых интрогрессивных форм H. vulgare с различным сочетанием рекомбинантных хромосом.

Background. The use of alien genetic material of bulbous barley Hordeum bulbosum L. to increase the diversity of cultivated barley Hordeum vulgare L. is an important task, since H. bulbosum is characterized by a number of valuable traits. One of the ways to use the genetic potential of bulbous barley is the interspecific hybridization and obtaining fertile introgressive lines of H. vulgare based on interspecific hybrids. The aim of the study was to obtain new introgressive forms of spring barley using interspecific triploid (HvHbHb) and tetraploid (HbHbHvHv) hybrids of cultivated barley with bulbous barley to expand the collection of introgressive lines of H. vulgare. Materials and methods. To create new introgressive forms, diploid barley H. vulgare (2x) cv. ‘Roland’,  was crossed with interspecific hybrids H. vulgare cv. ‘Roland’(2x) × H. bulbosum W851 (4х) (HvHbHb), and H. bulbosum A17 (4x) × H. vulgare ‘Borwina’ (4x) (HbHbHvHv). Cultivated barley forms with introgression of the bulbous barley genetic material were selected from the offspring from these crosses; then the selection was continued in two progenies from self-pollination of selected BC1 plants with three alien introgressions. Identification and localization of introgressions was carried out using the method of fluorescent in situ hybridization (GISH and FISH with chromosome-specific markers). Results. The crossing of cultivated barley with triploid and tetraploid interspecific hybrids H. vulgare × H. bulbosum yielded new forms of cultivated barley with recombinant chromosomes, among which two plants with three terminal introgressions of the genetic material of bulbous barley were identified. The first plant, derived from a triploid hybrid, showed introgressions in chromosomes 5HL, 1HL and 3HS. When two homologues with the 5HL introgression of the initial size are combined in the karyotype, the lethality of seedlings is observed in the offspring plants. In the second plant obtained on the basis of a tetraploid hybrid introgression was revealed in chromosomes 5HL, 2HL, and 7HS. In the offspring from self-pollination of this form, the presence of the 2HL introgression of the original size in both homologues led to plant sterility. Forms with a change in size of the introgression in 5HL and 3HS in the offspring of the first plant and with a change in size of the introgression in 2HL in the offspring of the second plant were detected, which indicated that meiotic recombination had occurred in those chromosome regions in BC1 plants. Conclusions A barley plant with the introgression of bulbous barley chromatin into chromosomes 1HL, 5HL, and 3HS of cultivated barley was identified in the offspring from a cross of cultivated barley with a triploid interspecific hybrid H. vulgare × H. bulbosum. In crosses with a tetraploid interspecific hybrid, a barley plant with the introgression into chromosomes 2HL, 5HL, and 7HS was found. On the basis of ‘Roland’ spring barley cultivar, two series of new introgressive forms of H. vulgare with various combinations of recombinant chromosomes have been created.

ячменьHordeum vulgareHordeum bulbosumмежвидовая гибридизацияin situ гибридизациячужеродная интрогрессияbarleyHordeum vulgareHordeum bulbosuminterspesific hybridizationin situ hybridizationalien introgressionРабота выполнена в рамках государственного задания согласно тематическому плану ВИР по проекту № 0662-2019-0006 «Поиск, поддержание жизнеспособности и раскрытие потенциала наследственной изменчивости мировой коллекции зерновых и крупяных культур ВИР для развития, оптимизированного генбанка и рационального использования в селекции и растениеводстве».The research was performed within the framework of the State Assignment according to the Thematic Plan of VIR, Project No. 0662-2019-0006 “Search for, Viability Maintenance and Disclosure of the Potential of Hereditary Variation in the VIR Global Collection of Cereal and Groat Crops for the Development of an Optimized Genebank and its Sustainable Utilization in Plant Breeding and Crop Production”.ReferencesBothmer R., Jacobsen N., Baden C., Jorgensen R.B., Linde-Laursen I. An ecogeographical study of genus Hordeum. Rome: International Plant Genetic Resources Institute; 1991.Bothmer R., Jacobsen N., Baden C., Jorgensen R.B., Linde-Laursen I. An ecogeographical study of genus Hordeum. Rome: International Plant Genetic Resources Institute; 1991.Bothmer R., Seberg O., Jacobsen N. Genetic resources in the Triticeae. Hereditas. 1992;(116):141-150. DOI: 10.1111/j.1601-5223.1992.tb00814.xBothmer R., Seberg O., Jacobsen N. Genetic resources in the Triticeae. Hereditas. 1992;(116):141-150. DOI: 10.1111/j.1601-5223.1992.tb00814.xBrown S.E., Stephens J.L., Lapitan N.L.V., Knudson D.L. FISH landmarks for barley chromosomes (Hordeum vulgare L.). Genome. 1999;42(2):274-281. DOI: 10.1139/g98-127Brown S.E., Stephens J.L., Lapitan N.L.V., Knudson D.L. FISH landmarks for barley chromosomes (Hordeum vulgare L.). Genome. 1999;42(2):274-281. DOI: 10.1139/g98-127Devaux P. The Hordeum bulbosum (L.) method. In: Maluszynski M. et al. (eds.). Doubled Haploid Production in Crop. Dordrecht; Boston: IAEA; 2003. p.15-19. DOI: 10.1007/978-94-017-1293-4_3Devaux P. The Hordeum bulbosum (L.) method. In: Maluszynski M. et al. (eds.). Doubled Haploid Production in Crop. Dordrecht; Boston: IAEA; 2003. p.15-19. DOI: 10.1007/978-94-017-1293-4_3Fukuyama T., Hosoya H. Genetic control and mechanism of chromosome eliminationin the hybrids between Hordeum bulbosum (4x) and H. vulgare (4x). The Japanese Journal of Genetics. 1983;58(3):241-250. DOI: 10.1266/jjg.58.241Fukuyama T., Hosoya H. Genetic control and mechanism of chromosome eliminationin the hybrids between Hordeum bulbosum (4x) and H. vulgare (4x). The Japanese Journal of Genetics. 1983;58(3):241-250. DOI: 10.1266/jjg.58.241Gottlob-McHugh S., Levesque M., MacKenzie K., Olson M., Yarosh O., Johnson D. Organization of the 5S rRNA genes in the soybean Glycine max (L.) Merrill and conservation of the 5SrDNA repeat structure in higher plants. Genome. 1990;33(4):486-494. DOI: 10.1139/g90-072Gottlob-McHugh S., Levesque M., MacKenzie K., Olson M., Yarosh O., Johnson D. Organization of the 5S rRNA genes in the soybean Glycine max (L.) Merrill and conservation of the 5SrDNA repeat structure in higher plants. Genome. 1990;33(4):486-494. DOI: 10.1139/g90-072Hoseinzadeh P., Ruge-Wehling B., Schweizer P., Stein N., Pidon H. High resolution mapping of a Hordeum bulbosum-derived powdery mildew resistance locus in barley using distinct homologous introgression lines. Frontiers in Plant Science. 2020;11:225. DOI: 10.3389/fpls.2020.00225Hoseinzadeh P., Ruge-Wehling B., Schweizer P., Stein N., Pidon H. High resolution mapping of a Hordeum bulbosum-derived powdery mildew resistance locus in barley using distinct homologous introgression lines. Frontiers in Plant Science. 2020;11:225. DOI: 10.3389/fpls.2020.00225Ho K.M., Kasha K.J. Genetic control of chromosome elimination during haploid formation in barley. Genetics. 1975;81(2):263-275.Ho K.M., Kasha K.J. Genetic control of chromosome elimination during haploid formation in barley. Genetics. 1975;81(2):263-275.Jones I.T., Pickering R.A. The mildew resistance of Hordeum bulbosum and its transference into H. vulgare genotypes. Annals of Applied Biology. 1978;88(2):295-298. DOI: 10.1111/j.1744-7348.1978.tb00709.xJones I.T., Pickering R.A. The mildew resistance of Hordeum bulbosum and its transference into H. vulgare genotypes. Annals of Applied Biology. 1978;88(2):295-298. DOI: 10.1111/j.1744-7348.1978.tb00709.xJohnston P.A., Pickering R.A. PCR detection of Hordeum bulbosum introgression in a H. vulgare background using a retrotransposon-like sequence. Theoretical and Applied Genetics. 2002;104(4):720-726. DOI: 10.1007/s00122-001-0791-2Johnston P.A., Pickering R.A. PCR detection of Hordeum bulbosum introgression in a H. vulgare background using a retrotransposon-like sequence. Theoretical and Applied Genetics. 2002;104(4):720-726. DOI: 10.1007/s00122-001-0791-2Lange W. Crosses between Hordeum vulgare L. and H. bulbosum L. I. Production, morphology and meiosis of hybrids, haploids and dihaploids. Euphytica 1971a:20:14-29. DOI: 10.1007/BF00146769Lange W. Crosses between Hordeum vulgare L. and H. bulbosum L. I. Production, morphology and meiosis of hybrids, haploids and dihaploids. Euphytica 1971a:20:14-29. DOI: 10.1007/BF00146769Lange W. Crosses between Hordeum vulgare L. and H. bulbosum L. II. Elimination of chromosomes in hybrid tissues. Euphytica. 1971b;20:181-194. DOI: 10.1007/BF00056078Lange W. Crosses between Hordeum vulgare L. and H. bulbosum L. II. Elimination of chromosomes in hybrid tissues. Euphytica. 1971b;20:181-194. DOI: 10.1007/BF00056078Leitch A.R., Schwarzacher T., Jackson D., Leitch I.J. In situ hybridization: а practical guide. Royal Microscopical Society: Microscopy Handbooks, no. 27. Oxford: BIOS Scientific Publishers; 1994.Leitch A.R., Schwarzacher T., Jackson D., Leitch I.J. In situ hybridization: а practical guide. Royal Microscopical Society: Microscopy Handbooks, no. 27. Oxford: BIOS Scientific Publishers; 1994.Michel M. Untersuchungen zur Übertragung von Resistenzgenen aus der Wildart Hordeum bulbosum L. in die Kulturgerste Hordeum vulgare L. PhD Thesis, Lehrstuhl für Pflanzenbau und Pflanzenzüchtung. München, Germany: Technische Universität; 1996. [in Deutsch]Michel M. Untersuchungen zur Übertragung von Resistenzgenen aus der Wildart Hordeum bulbosum L. in die Kulturgerste Hordeum vulgare L. PhD Thesis, Lehrstuhl für Pflanzenbau und Pflanzenzüchtung. München, Germany: Technische Universität; 1996. [in Deutsch]Пендинен Г.И., Чернов В.Е., Шольц М. Характеристика интрогрессивных линий ячменя, полученных на основе межвидового гибрида Hordeum vulgare L. × H. bulbosum L. (HvHbHb). Биотехнология и селекция растений. 2018;1(1):16-24. DOI: 10.30901/2658-6266-2018-1-16-24Pendinen G.I., Chernov V.E., Scholz M. Biological characterization of introgressive barley lines obtained on the basis of the interspecific hybrid Hordeum vulgare L. × H. bulbosum L. (HvHbHb). Plant Biotechnology and Breeding. 2018;1(1):16-24. DOI: 10.30901/2658-6266-2018-1-16-24Пендинен Г.И., Шольц М. Спаривание гомеологичных хромосом в метафазе I у триплоидных гибридов Hordeum vulgare L. × H. bulbosum L. (HvHbHb). Биотехнология и селекция растений. 2020;3(2):6-15. DOI: 10.30901/2658-6266-2020-2-o2Pendinen G.I., Scholz M. Homoeologous chromosome pairing at metaphase I of meiosis in Hordeum vulgare L. × H. bulbosum L. triploid hybrids (HvHbHb). Plant Biotechnology and Breeding. 2020;3(2):6-15. DOI: 10.30901/2658-6266-2020-2-o2Pickering R., Ruge-Wehling B., Johnston P.A., Schweizer G., Ackermann P., Wehling P. The transfer of a gene conferring resistance to scald (Rhynchosporium secalis) from Hordeum bulbosum into H. vulgare chromosome 4HS. Plant Breeding. 2006;125:576-579. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2006.01253.xPickering R., Ruge-Wehling B., Johnston P.A., Schweizer G., Ackermann P., Wehling P. The transfer of a gene conferring resistance to scald (Rhynchosporium secalis) from Hordeum bulbosum into H. vulgare chromosome 4HS. Plant Breeding. 2006;125:576-579. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2006.01253.xPickering R.A. The production of fertile triploid hybrids between Hordeum vulgare L. (2n=2x=14) and H. bulbosum L. (2n=4x=28). Barley Genetics Newsletter. 1988;18:25-29.Pickering R.A. The production of fertile triploid hybrids between Hordeum vulgare L. (2n=2x=14) and H. bulbosum L. (2n=4x=28). Barley Genetics Newsletter. 1988;18:25-29.Pickering R.A., Hudakova S., Houben A., Johnston P., Butler R.C. Reduced metaphase Iassociations between the short arms of homoeologous chromosomes in a Hordeum vulgare L. × H. bulbosum L. diploid hybrid influences the frequency of recombinant progeny. Theoretical and Applied Genetics. 2004;109(5):911-916. DOI: 10.1007/s00122-004-1725-6Pickering R.A., Hudakova S., Houben A., Johnston P., Butler R.C. Reduced metaphase Iassociations between the short arms of homoeologous chromosomes in a Hordeum vulgare L. × H. bulbosum L. diploid hybrid influences the frequency of recombinant progeny. Theoretical and Applied Genetics. 2004;109(5):911-916. DOI: 10.1007/s00122-004-1725-6Pickering R.A., Klatte S., Butler R. Reduced chromosome association between the short arms of 5H homologues in Hordeum vulgare L. at metaphase I. Plant Breeding. 2005;124(4):416-418. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2005.01122.xPickering R.A., Klatte S., Butler R. Reduced chromosome association between the short arms of 5H homologues in Hordeum vulgare L. at metaphase I. Plant Breeding. 2005;124(4):416-418. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2005.01122.xPickering R.A., Klatte S., Butler R.C. Identification of all chromosome arms and their involvementin meiotic homoeologous associations at metaphase I in 2 Hordeum vulgare L. × Hordeum bulbosum L. hybrids. Genome. 2006;49(1):73-78. DOI: 10.1139/G05-071Pickering R.A., Klatte S., Butler R.C. Identification of all chromosome arms and their involvementin meiotic homoeologous associations at metaphase I in 2 Hordeum vulgare L. × Hordeum bulbosum L. hybrids. Genome. 2006;49(1):73-78. DOI: 10.1139/G05-071Pickering R.A., Malyshev S., Künzel G., Johnston P.A., Korzun V., Menke M., Schubert I. Locating introgressions of Hordeum bulbosum chromatin within the H. vulgare genome. Theoretical and Appied Genetics. 2000;100(1):27-31. DOI: 10.1007/PL00002904Pickering R.A., Malyshev S., Künzel G., Johnston P.A., Korzun V., Menke M., Schubert I. Locating introgressions of Hordeum bulbosum chromatin within the H. vulgare genome. Theoretical and Appied Genetics. 2000;100(1):27-31. DOI: 10.1007/PL00002904Pickering R.A., Timmerman G.M., Cromey M.G., Melz G. Characterisation of progeny from backcrosses of triploid hybrids between Hordeum vulgare L.(2x) and H. bulbosum L.(4x) to H.vulgare. Theoretical and Appied Genetics. 1994;88(3-4):460-464. DOI: 10.1007/BF00223661Pickering R.A., Timmerman G.M., Cromey M.G., Melz G. Characterisation of progeny from backcrosses of triploid hybrids between Hordeum vulgare L.(2x) and H. bulbosum L.(4x) to H.vulgare. Theoretical and Appied Genetics. 1994;88(3-4):460-464. DOI: 10.1007/BF00223661Pidon H., Wendler N., Habekuß A., Maasberg A., Ruge-Wehling B., Perovic D., Ordon F., Stein N. High-resolution mapping of Rym14Hb, a wild relative resistance gene to barley yellow mosaic disease. Theoretical and Appied Genetics. 2021;134:823-833. DOI: 10.1007/s00122-020-03733-7Pidon H., Wendler N., Habekuß A., Maasberg A., Ruge-Wehling B., Perovic D., Ordon F., Stein N. High-resolution mapping of Rym14Hb, a wild relative resistance gene to barley yellow mosaic disease. Theoretical and Appied Genetics. 2021;134:823-833. DOI: 10.1007/s00122-020-03733-7Ruge B., Linz A., Pickering R., Proeseler G., Greif P., Wehling P. Mapping of Rym14Hb, a gene introgressed from Hordeum bulbosum and conferring resistance to BaMMV and BaYMV in barley. Theoretical and Appied Genetics. 2003;107(6):965-971. DOI: 10.1007/s00122-003-1339-4Ruge B., Linz A., Pickering R., Proeseler G., Greif P., Wehling P. Mapping of Rym14Hb, a gene introgressed from Hordeum bulbosum and conferring resistance to BaMMV and BaYMV in barley. Theoretical and Appied Genetics. 2003;107(6):965-971. DOI: 10.1007/s00122-003-1339-4Ruge-Wehling B., Linz A., Habekuß A., Wehling P. Mapping of Rym16Hb, the second soil-born virus-resistance gene introgressed from Hordeum bulbosum. Theoretical and Appied Genetics. 2006;113(5):867-873. DOI: 10.1007/s00122-006-0345-8Ruge-Wehling B., Linz A., Habekuß A., Wehling P. Mapping of Rym16Hb, the second soil-born virus-resistance gene introgressed from Hordeum bulbosum. Theoretical and Appied Genetics. 2006;113(5):867-873. DOI: 10.1007/s00122-006-0345-8Scholz M., Pendinen G. The Effect of Homoeologous Meiotic Pairing in Tetraploid Hordeum bulbosum L. × H. vulgare L. Hybrids on Alien Introgressions in Offspring. Cytogenetic and Genome Research. 2017;150(2):139-149. DOI: 10.1159/000455141Scholz M., Pendinen G. The Effect of Homoeologous Meiotic Pairing in Tetraploid Hordeum bulbosum L. × H. vulgare L. Hybrids on Alien Introgressions in Offspring. Cytogenetic and Genome Research. 2017;150(2):139-149. DOI: 10.1159/000455141Scholz M., Ruge-Wehling B., Habekuß A., Schrader O., Pendinen G., Fischer K., Wehling P. Ryd4Hb: a novel resistance gene introgressed from Hordeum bulbosum into barley and conferring complete and dominant resistance to the barley yellow dwarf virus. Theoretical and Appied Genetics. 2009;119(5):837-849. DOI: 10.1007/s00122-009-1093-3Scholz M., Ruge-Wehling B., Habekuß A., Schrader O., Pendinen G., Fischer K., Wehling P. Ryd4Hb: a novel resistance gene introgressed from Hordeum bulbosum into barley and conferring complete and dominant resistance to the barley yellow dwarf virus. Theoretical and Appied Genetics. 2009;119(5):837-849. DOI: 10.1007/s00122-009-1093-3Shtaya M.J.Y., Sillero J.C., Flath K., Pickering R., Rubeales D. The resistance to leaf rust and powdery mildew of recombinant lines of barley (Hordeum vulgare L.) derived from H. vulgare × H. bulbosum crosses. Plant Breeding. 2007;126(3):259-267. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2007.01328.xShtaya M.J.Y., Sillero J.C., Flath K., Pickering R., Rubeales D. The resistance to leaf rust and powdery mildew of recombinant lines of barley (Hordeum vulgare L.) derived from H. vulgare × H. bulbosum crosses. Plant Breeding. 2007;126(3):259-267. DOI: 10.1111/j.1439-0523.2007.01328.xWendler N., Mascher M., Himmelbach A., Bini F., Kumlehn J., Stein N. A high-density, sequence-enriched genetic map of Hordeum bulbosum and its collinefrity to H. vulgare. The Plant Genome. 2017;10(3):1-11 DOI: 10.3835/plantgenome2017.06.0049Wendler N., Mascher M., Himmelbach A., Bini F., Kumlehn J., Stein N. A high-density, sequence-enriched genetic map of Hordeum bulbosum and its collinefrity to H. vulgare. The Plant Genome. 2017;10(3):1-11 DOI: 10.3835/plantgenome2017.06.0049Yakura K., Tanifuji S. Molecular cloning and restriction analysis of Eco RI-fragments of Vicia faba rDNA. Plant Cell Physioljgy 1983;24(7):1327-1330. DOI: 10.1093/oxfordjournals.pcp.a076650Yakura K., Tanifuji S. Molecular cloning and restriction analysis of Eco RI-fragments of Vicia faba rDNA. Plant Cell Physioljgy 1983;24(7):1327-1330. DOI: 10.1093/oxfordjournals.pcp.a076650

The authors declare that there are no conflicts of interest present.