Preview

Биотехнология и селекция растений

Расширенный поиск
Принято в печать

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ БИОТЕХНОЛОГИИ

55
Аннотация

Эвкалипт Eucalyptus L’Hér. spp. является одной из наиболее важных плантационных древесных культур в мире. Настоящая работа представляет собой обзор современных биотехнологических подходов к его улучшению. Ключевые преимущества эвкалипта включают высокую продуктивность, быстрый рост и широкое хозяйственное применение – от производства целлюлозы и пиломатериалов до получения эфирных масел и секвестрации углерода, а также способность адаптироваться к разнообразным почвенно-климатическим условиям и интенсивно накапливать биомассу. Однако традиционная селекция древесных пород ограничена длительными циклами размножения, высокой гетерозиготностью и сложностью прогнозирования хозяйственно ценных признаков, что делает молекулярно-генетические подходы стратегически важным инструментом ускоренной селекции эвкалипта. Коммерческое внедрение генетически модифицированного эвкалипта наиболее активно развивается в Бразилии – на сегодняшний день это единственная страна, где такие линии разрешены для промышленного выращивания. Созданы растения с повышенной продуктивностью древесины (H421), растения с устойчивостью к гербициду глифосату благодаря введению гена cp4 epsps, а также линии, экспрессирующие гены инсектицидных Bt-белков, нарушающих функционирование кишечного эпителия насекомых и тем самым обеспечивающие защиту от чешуекрылых вредителей. Использование таких генетических модификаций повышает стабильность плантаций, снижает потери биомассы и способствует увеличению экономической эффективности лесного производства. Дополнительные возможности открывают методы молекулярной селекции, микроклонального размножения и редактирования генома с применением технологий CRISPR/Cas, обеспечивающие более точечное изменение генетического материала. В обзоре также рассматриваются перспективы использования «метаболической инженерии» для повышения фармакологической ценности эфирных масел. Развитие этих подходов требует совершенствования протоколов трансформации и регенерации эвкалипта, а также комплексной оценки экологических рисков и нормативно-правовых аспектов использования генетически модифицированных деревьев. Совокупность биотехнологических методов формирует основу для создания высокопродуктивных, устойчивых и адаптированных форм эвкалипта, отвечающих современным требованиям устойчивого лесного хозяйства и рационального природопользования. Таким образом, генная инженерия представляет собой стратегический инструмент для создания следующего поколения высокопродуктивных и устойчивых эвкалиптовых плантаций, однако ее развитие требует сбалансированного подхода, учитывающего научные, экологические, юридические и общественные аспекты.

ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ РЕСУРСОВ РАСТЕНИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТОДОВ МОЛЕКУЛЯРНОЙ ГЕНЕТИКИ

116
Аннотация

Актуальность. Пасмо (септориоз) льна, вызываемое патогенным грибом Septoria linicola (Speg.) Garass, представляет собой одно из наиболее экономически вредоносных заболеваний этой культуры. Болезнь наносит значительный ущерб, приводя к существенному снижению урожайности и ухудшению качества волокна и семян. Отсутствие в производстве устойчивых сортов обуславливает высокую актуальность поиска и молекулярной идентификации генов устойчивости для их последующего использования в селекционных программах. Материалы и методы. Объектом исследования служили 46 сортов льна Linum usitatissimum L., из которых 29 относились к льну-долгунцу и 17 ‒ ко льну масличному. В работе проводили ПЦР-скрининг на наличие двух генов-кандидатов устойчивости к пасмо: Lus10003106, кодирующего рецептор-подобную киназу, участвующую в индуцированном патогенами иммунитете (PTI), и Lus10022077, кодирующего белок семейства NBS-LRR, ключевой для эффектор-индуцированного иммунитета (ETI). Амплификацию целевых фрагментов проводили методом qPCR-RT со специфичными праймерами. Результаты. В результате ПЦР-анализа ген Lus10003106 был выявлен у 18 из 29 изученных сортов льна-долгунца. Ген Lus10022077 идентифицирован у 16 сортов льна-долгунца и 11 сортов льна масличного. Молекулярный анализ показал наличие обоих исследуемых генов у 13 образцов льна-долгунца. Заключение. Проведенный скрининг позволил выявить сорта льна, у которых обнаружены соответствующие гены, ассоциированные с различными типами иммунного ответа ‒ базовым (PTI) и специфичным (ETI). Наличие целевых генов у исследуемых образцов указывает на потенциальную устойчивость к пасмо, однако требует дальнейшего подтверждения в фитопатологических исследованиях с использованием штаммов из популяции льносеющих регионов России. Данные генотипы могут представлять потенциальную ценность в качестве доноров для селекционных программ, направленных на создание сортов льна с высокой устойчивостью к патогену.

79
Аннотация

Актуальность. Поиск с помощью ДНК-маркеров генотипов с аллелями генов, определяющих высокую скрещиваемость мягкой пшеницы (МП) с рожью, а также их контролируемая передача в другие генотипы остаются пока нерешенными проблемами. Задачи данного исследования: 1) идентификация in silico новых SSR-локусов с мотивами в 3-4 пн, расположенных в участках локализации генов SKr и Kr1, контролирующих скрещиваемость МП с рожью, разработка и апробация специфичных праймеров для амплификации последовательностей в этих локусах; 2) характеристика вариабельности фрагментов ДНК в SSR-локусах в выборке из образцов гексаплоидной пшеницы; 3) определение диагностической эффективности аллелей SSR-локусов в выявлении генотипов МП с высокой/низкой скрещиваемостью с рожью, а также уточнение характера полиморфизма участков ДНК, ассоциированных с генами SKr и Kr1. Материалы и методы. Основой для исследования послужил референсный геном МП сорта ‘Chinese Spring’. Поиск SSR-локусов проводили in silico. Апробацию разработанных или взятых из литературы праймеров для выявления полиморфизма в SSR-локусах осуществляли с использованием тестовой выборки из 16 образцов МП разного географического происхождения. Для генотипирования выборки суммарно использовали 16 пар праймеров. Характеристика SSR-локусов дана на основе анализа 69 линий МП и девяти линий синтетической гексаплоидной пшеницы, из которых 51 была с высокой (25-100%) и 27 с низкой (0-9%) скрещиваемостью с рожью. Результаты. Разработаны специфичные праймеры для амплификации последовательностей 14 SSR-локусов с мотивами в 3-4 пн, находящихся в участках генома CS, в которых локализованы гены SKr и Kr1. Полиморфными оказались два локуса, ассоциированные с геном SKr, и четыре – с Kr1. Диагностической эффективностью в идентификации генотипов МП с высокой/низкой скрещиваемостью с рожью обладали аллели SSR-локуса Xvir1 (Ef=82,3%) – маркера гена SKr, а также SSR-локусов Xvir9 (Ef=66,7%) и Xvir10 (Ef=72,5%), ассоциированных с геном Kr1. Совместное использование аллелей локусов позволило точнее описать полиморфизм участков локализации генов SKr и Kr1, а также дифференцировать линии МП с учетом их географического происхождения и скрещиваемости с рожью. Заключение. Выявленные in silico новые полиморфные SSR-локусы с повторяющимися мотивами в 3-4 пнучастках локализации генов SKr и Kr1, могут быть ценным инструментом для дальнейшего позиционного клонирования этих генов. Их можно также использовать при подборе пар для скрещиваний и в контроле передачи аллелей, сопряженных с «высокой скрещиваемостью с рожью» в другие генотипы мягкой пшеницы.

91
Аннотация

Актуальность. Современный этап развития генетики и селекции картофеля характеризуется интенсификацией работ ведущих селекционных фирм по внедрению технологии получения диплоидных гибридов F1, размножаемых ботаническими семенами. Однако широкое применение этой технологии осложняется недостатком или отсутствием в международных генетических банках образцов, необходимых для ее инициации. В Институте генетики и цитологии НАН Беларуси создана коллекция селекционного материала для проведения эффективной селекции картофеля на диплоидном уровне. Цель работы – оценить возможность и определить особенности использования этой коллекции для реализации программы маркер-опосредованной селекции диплоидных гибридов картофеля, которая стартовала в Институте генетики и цитологии НАН Беларуси в 2021 году. В задачи исследования входило: оценить эффективность схем получения исходного материала для закладки диплоидных инбредных линий картофеля; отобрать по клубневой продуктивности, признакам культурного картофеля, и устойчивости к болезням и вредителям фертильные самосовместимые диплоидные клоны S1(F2) для последующего создания инбредных линий; получить семена самоопыленных клонов S2(F3). Результаты. Показано, что наиболее эффективными для закладки инбредных линий являются схемы с участием селекционно продвинутых диплоидных клонов на основе межвидовых гибридов и доноров фертильности и самосовместимости Solanum tuberosum L. Всего получено 3212 семян (36,5 семян/ягоду) от самоопыления 38 перспективных гибридов пяти схем. Отобрано для получения инбредных линий самоопыленное потомство 29 образцов диплоидного картофеля. Семена от самоопыления диплоидных клонов обладали пониженной всхожестью и слабым развитием сеянцев: в горшки с торфогрунтом высажено менее 20% возможного их количества. При уборке отобрано по признакам культурного картофеля 167 сеянцев самоопыленных клонов S1. По результатам полевых испытаний 67 клонов S1 из 156 (42,9%) завязали ягоды от самоопыления. Из них отобрали по признакам культурного картофеля и полевой устойчивости к фитофторозу 36 клонов (23,1%). Они ведут происхождение от 17 диплоидных клонов, несущих ДНК-маркеры ряда генов устойчивости к болезням и вредителям. Семена от их самоопыления: всего 4699 шт., из которых 4382 от клонов S1 на основе межвидовых гибридов, будут использованы для получения и отбора самоопыленных клонов S2. Заключение. Использованная в работе коллекция диплоидного картофеля пригодна для закладки инбредных линий. Наиболее эффективные схемы создания исходного материала – на основе межвидовых гибридов и оригинальных линий S. tuberosum доноров фертильности и самосовместимости. Получены семена от самоопыления фертильных самосовместимых клонов S1 на основе исходных диплоидных клонов, несущих ДНК-маркеры ряда ценных для селекции генов устойчивости к болезням и вредителям.

СОХРАНЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ РЕСУРСОВ РАСТЕНИЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПОДХОДОВ

49
Аннотация

Актуальность. Семена сои Glycine max (L.) Merr. при хранении в комнатных неконтролируемых условиях влажности и температуры воздуха быстро утрачивают всхожесть. Это определяет необходимость использования специальных приемов для сохранения коллекционных образцов. Низкотемпературное хранение (НХ) в условиях низкой влажности окружающей среды позволяет значительно дольше поддерживать высокое качество семян, однако и в таком случае часть образцов может снижать всхожесть. Это делает актуальным исследование результатов многолетнего сохранения образцов сои в Генбанке ВИР. Кроме того, важно учитывать, что от момента выемки семян из низкотемпературных хранилищ до их посева в поле может проходить несколько месяцев хранения при комнатных условиях. В работе была поставлена задача оценить динамику изменения всхожести семян сои при низкотемпературном хранении и последующем хранении в комнатных условиях. Материалы и методы. Работа выполнена на 290 образцах сои коллекции ВИР, происхождение которых охватывает практически весь ареал культивирования этой культуры. Репродукция образцов осуществлялась с 2000 по 2016 гг. на опытных станциях ВИР: Адлерской опытной станции, Кубанской опытной станции (Краснодарский край) и Дальневосточной опытной станции (Приморский край). Семена хранили в запаянных ламинированных пакетах из алюминиевой фольги при температуре –10°С. Выемка образцов из НХ выполнена весной 2022 года. Затем образцы хранились шесть месяцев в бумажных пакетах в комнатных условиях. Всхожесть семян определяли перед закладкой на хранение (Gi), сразу после выемки образцов из НХ (G1) и после хранения в комнатных условиях(G2). Оценивали индексы всхожести, рассчитанные по формулам: GI1=G1/Gi, для периода НХ и GI2=G2/G1 после и хранения при комнатных условиях. Результаты. Всхожесть семян на момент закладки (Gi) составляла от 12 до 100% (медианное значение 82,0%), всхожесть после НХ (G1) – от 5 до 97% (64,5 %) и после хранения в комнате (G2) от 0 до 100% (47,5%). GI1 имел значения от 0,1 до 1,4 (медианное значение 0,78), а GI2 от 0,0 до 1,68 (0,83). GI1 и GI2 не имеют связи с исходными значениями всхожести (коэффициенты корреляции r=0,14 и 0,16). По показателю GI1 лучшие результаты хранения показали семена, выращенные на Дальневосточной опытной станции: 0,83 по сравнению с 0,79 для образцов с Адлерской станции и 0,69 для образцов с Кубанской станции. Заключение. При НХ в течение 6-22 лет при температуре –10°С и последующем хранении в комнатных условиях в течение 6 месяцев медианные значения всхожести семян сои снизились на 17,5% и 17,0% соответственно. Степени изменения всхожести после НХ и хранения в комнатных условиях не связаны с исходными значениями всхожести. Разброс значений индексов всхожести после НХ (GI1) и последующего хранения в комнатных условиях (GI2) свидетельствует о том, что образцы сои различаются по реакции на хранение. Сведения о конкретных образцах могут быть использованы в дальнейшем в генетических исследованиях. Для оптимизации подготовки к посеву семян образцов после НХ рекомендуется сокращать период их хранения в комнатных условиях. Условия Дальневосточной опытной станции наиболее благоприятны для размножения образцов семян сои из коллекции ВИР с целью их последующего НХ.

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

246
Аннотация

Для создания устойчивых к заболеваниям сортов яблони требуется поиск источников генов резистентности и вовлечение их в селекционную работу. Проведена идентификация генов устойчивости к мучнистой росе и бактериальному ожогу у семи осенних и 18 зимних сортов яблони селекции НИИ «Жигулёвские сады». Использованы молекулярные маркеры АЕ10-375 и GE-8019 QTL FBF7 устойчивости к бактериальному ожогу, а также кодоминантный маркер АТ20 SCAR (ген Pl-1), доминантные маркеры EM DM01 (ген Pl-d) и EM М02 (ген Pl-w) устойчивости к мучнистой росе. Установлено, что гены Pl-1, Pl-w и Pl-d устойчивости к мучнистой росе в генотипе анализируемых сортов яблони отсутствуют. Показано, что хотя бы один из маркеров устойчивости к бактериальному ожогу, АЕ10-375 и/или GE-8019 QTL FBF7, присутствует в генотипе 80% анализируемых сортов. Маркер АЕ10-375 идентифицирован у 10 сортов, маркер GE-8019 у 18 сортов, то есть частота встречаемости маркера GE-8019 у анализируемых сортов яблони в 1,8 раза больше, чем маркера АЕ10-375. Сорта ‘Спартанец’, ‘Самарский Сувенир’, ‘Самарчанин’, ‘Скиф’, ‘Кутузовец’, ‘Самара’, ‘Спартак’, ‘Князь Засекин’ содержат в одном генотипе два маркера и являются потенциальными источниками устойчивости к бактериальному ожогу, которые могут быть использованы в качестве исходных форм при создании сортов яблони с повышенной адаптивностью к абиотическим и биотическим стресс-факторам для условий Поволжья.

90
Аннотация

Arabidopsis thaliana L. является классическим модельным объектом, у которого подробно описаны механизмы регуляции биосинтеза флавоноидных пигментов с участием генов AtTT2, относящихся к семейству R2R3-MYB, и AtTT8 из семейства bHLH-MYC. Актуальным остается вопрос о судьбе дуплицированных копий у аллополиплоидных видов, возникших в результате межвидовой гибридизации, удобной моделью для изучения которого является хлопчатник вида Gossypium hirsutum L. В субгеномах At и Dt G. hirsutum идентифицированы копии генов GhTT2, GhMYB10 и GhTT8, являющиеся ортологами соответствующих генов A. thaliana. В настоящей работе на основе секвенирования аллелей указанных регуляторных генов у образцов хлопчатника c контрастной окраской волокна и гипокотиля оценивается роль аллополиплоидизации в эволюции дуплицированных регуляторных генов, кодирующих компоненты MBW-комплекса: транскрипционные факторы семейств R2R3-MYB, bHLH-MYC, WD40. Для генов семейства R2R3-MYB хлопчатника выявлен асимметричный характер эволюции, при котором гены субгенома Аt эволюционируют быстрее и находятся под менее строгим очищающим отбором по сравнению с гомеологами субгенома Dt. Секвенированные последовательности впервые депонированы в международную базу данных GenBank (NCBI).

 

86
Аннотация

Введение. Донник Melilotus Mill. – это ценная бобовая культура с большим фитомелиоративным потенциалом. Присутствие кумаринов способствует преодолению растением неблагоприятных условий внешней среды. Однако, соединения фенольной природы, обладающие горьким вкусом и специфическим запахом, ухудшают поедаемость кормов из донника. Одно из важнейших направлений селекции донника – создание сортов с определенным содержанием кумаринов, от которого зависит их дальнейшее использование. Для отбора селекционного материала по этому признаку требуются легко воспроизводимые лабораторные методы определения кумаринов в растительном сырье. Исследовали семена шести образцов донника из коллекции ВИР. Применили модифицированную методику спектрофотометрического определения содержания кумаринов в спиртовом извлечении из измельченных семян. Количественное определение кумаринов проводили с помощью спектрофотометра UV-3000 (Китай), при длине волны 310 нм. Расчет содержания кумаринов производили на основе калибровочной кривой, построенной на растворах кумарина различной концентрации. Заключение. Разработана и опробована методика выделения и количественного определения суммы кумаринов в семенах шести образцов донника, относящихся к пяти разным видам.



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2658-6266 (Print)
ISSN 2658-6258 (Online)